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2020年銀水灣論壇—非洲豬瘟系列檢測技術與疫苗研發的進展及 實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用


5月15日,由哈爾濱國生生物科技股份有限公司主辦的銀水灣論壇網上課堂開講啦。第一節課由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所豬傳染病研究室主任、豬烈性傳染病創新團隊首席科學家仇華吉研究員給大家帶來《走在病毒前面----實驗室檢測在非洲豬瘟檢測中的作用》。

仇老師主要從事豬瘟、非洲豬瘟和偽狂犬病等烈性傳染病的基礎和應用研究。先后主持國家863項目、國家十三五重點研發項目、國家自然科學基金重點項目等20余項,以通訊作者發表SCI收錄論文70余篇,獲國家科技進步二等獎2項、黑龍江省科技進步一等獎3項、國家發明專利9項、農業轉基因產品安全證書2個,主編或參編學術專著8部。

非洲豬瘟自2018年進入中國,已經在我國擴散和流行近兩年時間。現在這個病大面積已經被控制住了,但是在局部地區還呈現區域性的散發或者地方性的流行。本次網上講堂特邀仇華吉研究員給我們講述非洲豬瘟系列檢測技術與疫苗研發的進展及實驗室檢測在非洲豬瘟防控中的作用等一系列問題。下面讓我們走進仇老師的課堂。

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仇老師給大家細致的分析了當前養豬業的形勢:目前我國種豬缺口比較大,產能有限,恢復正常生產性能仍要一段時間;生豬的存欄量處于一個較低水平,總體市場供應呈現出一種供不應求的情形,因此豬肉價格整體來說還是會緩慢的上漲。

仇老師指出目前國家對于養豬業的任務要求:到2020年底,我國農業部要求我國的生豬存欄量恢復到疫情前的80%,選取一部分肉豬(三元母豬)進入種豬行列,盡快恢復產能,養豬業是我們國家“穩產保供”的一個政治任務,這是一個民生課題,是關系國家國計民生的大事。


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那么,對于非洲豬瘟大家是如何看待的呢?仇老師表示,科學家以及養殖戶經過一年多與非洲豬瘟的較量,已經對它有了科學的認識,少了最初爆發時的恐懼,只要依靠生物安全技術以及科學的精細化管理,另外在資金、技術、人才方面有一定的保障,非洲豬瘟是可防可控的。


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我們國家養豬業是一個系統工程,所以防控非洲豬瘟更應該注重的是在品種、營養、環境、管理、防疫等方面的綜合實力。仇老師向大家分享了科學的“防非戰略”:篤定決心、堅定信心,系統思維、綜合防控,科學決策、精準施策,實事求是,與時俱進;以及“防非策略”:控制傳染源頭,降低病毒載量,提升感染閾值,維持陰性群體。防非的重點主要在于防控,仇老師告誡我們應當重點關注防控非洲豬瘟的三個重要環節:阻斷病毒源頭,降低病毒載量,提高豬只耐受性。

現在新冠肺炎疫情后的復工復產已基本開始了,一些豬場陸續開始復養。為了使大家復養成功,仇老師講解了復養的程序主要有以下幾個方面:①復養前,進行風險評估,評估豬場所在位置的大環境。②豬場硬件設備升級改造,對豬場制度流程的完善。③定期全面洗消(消毒-清洗-消毒-干燥-熏蒸)。④科學、全面的取樣、采樣。⑤哨兵豬的選取。⑥技術人員持證上崗,系統培訓,定期考核。⑦全面復養,持續檢測。⑧制定應急預案,并反復演練。

仇老師強調,科學復養的過程其實并不難,但是復養完成后,更應該引起我們重視的是如何避免病毒再次光臨豬場呢?仇老師表示,要通過實驗室檢測,實驗室檢測就像國防雷達系統一樣,是養豬人的眼睛,大家肉眼是看不到病毒的活動跡象的,但是可以借助科學的生物安全監測,包括風險預警、洗消效果評價、生物安全流程優化、精準清除復養前評估等。

仇老師向我們介紹了實驗室常用的非洲豬瘟檢測方法,分為核酸檢測、抗原檢測和抗體檢測。仇老師有細致的分析了不同的檢測方法的各優缺點。如下表所示。


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實驗室檢測非洲豬瘟的試劑盒,仇老師具體介紹了兩種熒光PCR試劑盒:普通型和免提取型。同時與其他試劑盒的各個參數進行了比較,為大家選取適合自己豬場的試劑盒提供參考。另外還有敏感性比較好的抗原抗體檢測方法可供大家選取。


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如果大家擔心遇到非洲豬瘟和豬瘟兩種不同傳染病交叉感染的情況時,不要慌!仇老師向我們系統的講解了非洲豬瘟和豬瘟雙重熒光定量PCR的方法,非洲豬瘟敏感性為每微升10拷貝,而豬瘟的檢測限可達每毫升10 TCID50。


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各種實驗室檢測的原理、方法,仇老師已經全面的向大家展示了,但是為了在檢測時不出現污染的情況,仇老師告誡我們,實驗室檢測布局也是獲取正確的實驗結果所必須的,實驗室檢測布局要做到實驗功能分區,樣品處理、核酸提取、加樣、PCR擴增等不同區域單向流動,互不交叉;在做完實驗后要對實驗區域進行消毒,保證后續實驗順利進行;實驗過程要進行生物安全措施,對樣品進行無害化處理;定期對實驗室環境進行評估,以及各種污染治理。


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檢測前,科學合理的采集樣品也是保障實驗室檢測順利進行的一個重要環節,而且仇老師也著重強調了,采樣不僅僅只是在豬場內外環境,還要對人員及運輸車輛入場前、洗消烘前后進行采樣,對于高風險豬可以采樣后再進行無害化處理,為后續防控提供依據。

檢測后,對實驗結果出現假陽性和假陰性怎么辦?別急,仇老師分析原因可供大家參考:①檢測方法/試劑盒的特異性和敏感性差;②環境污染(氣溶膠污染、人員流動造成交叉污染、儀器消毒不徹底等);③采樣不規范,樣品處理或保存不當,樣品中含有其它雜質等;④核酸提取/PCR擴增失敗;⑤病毒基因組發生變異。

仇老師表示,避免出現這些假陽性和假陰性的實驗結果,就要提高實驗室檢測的準確性,可以從以下幾個方面注意:①技術人員定期培訓;②優化實驗流程方案;③設立對照組;④選擇特異性好,靈敏度高的檢測試劑盒;⑤選擇實驗最適合的檢測方法;⑥PCR實驗室環境污染監控,監控頻率要每周1至2次。

隨后,仇老師給大家介紹了實驗室常見的檢測誤區,包括:檢測與臨床的脫節、實驗室設計不合理、采樣設計不科學、檢測滯后、混淆診斷性樣本和篩查性樣本、分不清診斷性檢測和風險評估、對檢測方法的優缺點認知不清等一系列實驗室常見問題;并著重對并聯檢測和串聯檢測進行講解。


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最后仇老師在直播間進行了答疑,解決了大家的問題,非常感謝仇老師為大家解答疑惑。這一次課堂仇老師系統全面的從當前養豬業的形勢和任務、對非洲豬瘟的科學認知、防非的系統思維、非洲豬瘟防控關鍵點、非洲豬瘟疫情后的復養程序和實驗室檢測各個方面進行系統的闡述,為非洲豬瘟疫情后我國養殖戶恢復豬只飼養提供了全方位的指導,希望能給大家帶來幫助。最后,再次感謝仇華吉研究員的精彩分享!

 

銀水灣論壇:             

自2016年以來,《銀水灣論壇》已成功舉辦四屆。論壇由哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心)與股東單位哈爾濱維科生物技術開發公司、哈藥集團生物疫苗有限公司共同主辦,中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所、中國獸醫藥品監察所、北京中海生物科技有限公司協辦。

四年來,本著“引領中國獸用生物制品產業技術創新與融合發展,構建公益性平臺的辦會宗旨”,匯聚行業精英各抒己見,聚焦行業健康發展共商良策,力求從不同視角、更高角度為行業同仁們提供一個展示與交流的平臺,促進行業技術進步,《銀水灣論壇》已成為在業內享有較高盛譽和影響力的行業盛會。

《銀水灣論壇》網上課堂會繼續秉持“創新、融合、發展”的精神,邀請業內大咖做客直播間,為大家構建便捷、有效、公益性的前沿知識學習平臺。

企業介紹:

哈爾濱國生生物科技股份有限公司(動物用生物制品國家工程研究中心,以下簡稱國生生物)是經國家發改委批準,由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所牽頭,聯合中國獸醫藥品監察所等企事業單位共同組建、具有獨立法人資格的科技型高新技術企業,是動物生物制品行業內唯一的國家級工程研究中心。形成了從動物生物制品的研發、孵化、轉化到生產和銷售的全產業鏈,建立了多個開放性技術平臺,成為國內領先的動物生物制品新產品的創新基地、孵化基地和示范性生產驗證基地。

牧科傳媒 陳靜整理